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奶山羊人工授精技术
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1 范围
本标准规定了奶山羊的人工授精室建设、种公羊选择与管理、器械消毒、采精、精液品质检查、精液稀释、母羊发情鉴定、输精等技术环节。
本标准适用于奶山羊的规模羊场、养殖小区和人工授精站(点)。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
2.1 
奶山羊 dairy goat
以生产羊奶为主要经济用途的山羊。
2.2 
种公羊 stud ram
符合品种标准、具有种用价值并参加配种的公羊。
2.3 
假阴道 artificial vagina
模拟母羊阴道环境条件的采精工具,由外壳、内胎、漏斗、集精杯等组成。
2.4 
采精 semen collection
用人工模拟且具有自然交配感的工具获得公羊精液的方法。
2.5 
精液 semen
由公羊的生殖器官产生并排出体外含有精子的体液。
2.6 
精子活力 sperm viability
精子的活动能力。在38 ℃左右、400倍显微镜下,观察到的呈直线运动精子数占总精子数的比例。常用0.1至0.9表示。
2.7 
精子密度 sperm density
每毫升精液中的精子数。在显微镜下观察,根据精子之间的空隙大小评定为三级,即空隙小于一个精子长度时为“密”;空隙约为一个精子长度时为“中”,空隙大于一个精子长度时为“稀”。
3 人工授精室
3.1 建造要求
3.1.1 采精室面积10 m2~15 m2、精液品质检查室10 m2和输精室10 m2。
3.1.2 室温应保持在18 ℃~25 ℃,室内及周围环境卫生状况良好。
3.2 器具物品
常用仪器、物品等参见附录A。
4 种公羊选择与管理
4.1 种公羊选择
所选用种公羊应符合品种特征和达到一级以上要求,并具有良好的种用体况。
4.2 种公羊管理
4.2.1 非配种期种公羊可集中饲养,配种期单圈或小群饲养。
4.2.2 成年公羊在配种前45 d更换为配种期日粮,并定人、定时采精,第一周采精1次,第二周采精2次,逐渐增加采精频率,至配种前1周达到每隔1 d采精1次。
4.2.3 初次使用的青年公羊,采精训练从8月龄开始,刚开始每周采精1次,周岁后正常采精。
4.2.4 正常采精时,每周可采精3 d~5 d,每天可采精1~2次,采精间隔为2 h。冬春季节宜上午采精,夏秋季节宜早上采精。
5 器具消毒
5.1 器具清洗
5.1.1 所有器具使用前,应先用中性皂粉彻底清洗,再用清水冲洗干净;直接接触到精液的器械如集精杯等还要用蒸馏水再冲洗两遍;晾干备用。
5.1.2 采精结束后,假阴道、集精杯应立即放进水中浸泡,先用清水冲洗一遍,再进行正常清洗。
5.2 器具消毒
5.2.1 玻璃棒、镊子、纱布、医用凡士林、生理盐水棉球等用高压蒸汽灭菌锅121 ℃灭菌15 min。
5.2.2 假阴道内胎、集精杯用75 %酒精进行表面灭菌。用长柄镊子夹持酒精棉球,从内向外旋转,擦拭消毒内胎及集精杯,或用酒精喷壶将内胎及集精杯等表面喷湿消毒。
5.2.3 开膣器应用0.1 %新洁尔灭或10 %高锰酸钾溶液浸泡消毒。
6 采精
6.1 台羊
6.1.1 台羊应为健康母羊,四肢健壮,体型大小合适。
6.1.2 初次采精的公羊应选择发情期母羊作为台羊;对训练有素的公羊可用非发情期母羊或假台羊。
6.2 清洗种公羊包皮
采精之前,应用剪刀剪去阴茎包皮前端的长毛,并用灭菌湿毛巾将包皮周围擦拭干净。
6.3 假阴道的安装
6.3.1 安装前,先检查假阴道外壳是否有裂缝或小孔;内胎是否漏气或沙眼,边缘是否有裂口;活塞是否漏气。用前将内胎放入开水中浸泡3 min~5 min。
6.3.2 安装时,先将内胎装入外壳,光面朝内,两头伸出外壳等长,然后依次将内胎两端翻套在外壳上,调整内胎方向和紧张度,使其稍绷紧且无扭转,最后在两端分别套上橡皮圈固定。
6.3.3 把集精杯装在假阴道一端。从假阴道采精口一端,用消毒玻棒蘸取少许医用白凡士林油均匀涂于假阴道内胎的前1/3段。
6.3.4 从注水孔向假阴道与内胎夹层中加入50 ℃~55 ℃的热水150 mL~180 mL,左右晃动使内胎受热均匀;用温度计检测内胎表面温度达40 ℃~42 ℃为宜。从注水孔向假阴道夹层内吹入适量空气,使假阴道采精口端的内胎胀起呈三角形。
6.4 采精方法
6.4.1 采精场所要固定,场地平坦避风,环境卫生、安静。
6.4.2 把公羊牵到采精现场后,不要立即采精,让其空爬跨两次。
6.4.3 采精员蹲于台羊右后侧,右手持假阴道,与地面呈35°~40°角倾斜;当公羊爬跨台羊伸出阴茎时,迅速用左手托住阴茎包皮,顺势将阴茎导入假阴道内;待公羊用力前挺完成射精后,将假阴道后撤竖起,放掉内胎中间空气,取下集精杯,盖上集精杯盖,编号待检。
7 精液品质检查
7.1 射精量
成年公羊每次射精量应为0.5 mL~2.0 mL,一般为1.0 mL。
7.2 感官检查
正常精液呈乳酪白色,无味或略带腥味。颜色或气味异常的精液均不可用于输精。
7.3 显微镜检查
用移液枪吸取原精液5 μL~10 μL,滴在洁净预热过的载玻片上,盖上盖玻片,在400倍生物显微镜下观察。原精精子活力在0.6以上、精子密度达到“中”以上时,方可稀释使用。
8 精液的稀释
8.1 配制稀释液
8.1.1 复合稀释液的配制
8.1.1.1 基础液:三羟甲基氨基甲烷(Tris)3.40 g,柠檬酸1.90 g,葡萄糖0.55 g,蒸馏水加至100 mL,定容,用0.25 μm的滤膜滤过除菌。配成的基础液在4 ℃下保存备用,保存期不超过7 d。
8.1.1.2 稀释液:取基础液80 mL,加入新鲜卵黄20 mL,青、链霉素各5万单位,充分混匀。稀释液应现用现配,储存时间不超过12 h。
8.1.2 其他可供选择的稀释液。包括0.9 %注射用生理盐水,或维生素B12注射液,或煮沸过滤的鲜羊奶均可作为稀释液。但这类稀释液保持时间短,精液稀释倍数不宜过高。
8.2 稀释精液
8.2.1 根据原精液品质确定稀释倍数。精子活力达0.6以上,可作1~5倍稀释;精子密度在25亿以上,可作10倍以上稀释。
8.2.2 在作3倍以下稀释时,先把稀释液与原精液同时置于30 ℃左右的水浴锅或恒温箱中等温预热,再将稀释液沿杯(瓶)壁缓缓加入精液中,然后轻轻摇动或用无菌玻棒搅拌,使之混合均匀。
8.2.3 在作高倍稀释时,应分多次完成,每次不超过3倍,放置10 min后再次稀释。
8.2.4 稀释后精液需再次检验品质,精子活力在0.3以上、精子密度达到“中”以上时方可使用。
8.2.5 把合格的精液分装在离心管或0.25mL的细管中,注明种公羊号、采精时间、精液量及活力等。
9 精液的保存运输
9.1 保存
把装有精液的离心管或精液细管束放进装满30 ℃温水的500 mL烧杯内,一同放入4 ℃冰箱中,约2 h后温度可降至4 ℃。
9.2 运输
在运输途中,要维持低温,避光,防震。
9.3 使用
9.3.1 稀释后2 h内的精液可直接使用,不需要降温处理。
9.3.2 到达输精点后的精液,使用前应在室温条件下自然升温,经检查合格后尽快使用。已升温的精液不得再降温储存。
10 母羊发情鉴定
10.1 外部观察法
奶山羊发情特征明显。发情母羊一般表现为兴奋不安、不断鸣叫、频频摆动尾巴、食欲减退;主动接近公羊,有爬跨行为;外阴部充血、肿胀、流出粘液。
10.2 阴道检查法
先将母羊保定好,消毒外阴部;再把内窥镜镜筒(或开膣器)涂上凡士林插入母羊阴道,打开电源(或用手电筒)观察阴道内部变化。如发现阴道黏膜充血、有透明黏液渗出,子宫颈口开张、潮红、有黏性分泌物时,即可定为发情。
11 输精
11.1 输精时间
11.1.1 通常做法是在母羊出现发情特征12 h时输精。如早晨发现母羊发情,可在当天下午输精;如傍晚发现母羊发情,则在翌日上午输精。为提高受胎率,可在第一次配种后6 h~8 h进行第二次输精。
11.1.2 根据发情鉴定结果确定的最佳输精时间,一般是母羊发情特征刚好消失、行为变安静时,或者子宫颈口开张、颜色潮红时。
11.2 输精方法
11.2.1 先将母羊保定,对外阴部清洗、消毒;再将经消毒的开膣器轻缓地插入阴道,打开阴道,寻找子宫颈口,最后将输精器插入子宫颈口内1 cm~1.5 cm处,注入精液。
11.2.2 用过的输精器及开膣器须再经清洗消毒后,方可给另一只母羊输精使用。
11.3 输精量
11.3.1 正常情况下,每只母羊的输精量为原精液0.05 mL~0.10 mL,稀释精液0.15 mL~0.20 mL。
11.3.2 初配母羊阴道狭窄,开膣器无法充分展开,找不到子宫颈口,可采用阴道输精,但输精量至少增加一倍。
12 记录档案
12.1 种公羊采精及精液品种检查记录
包括采精日期、公羊耳号、射精量、精液颜色、精液气味、精子活力、精子密度、稀释倍数、稀释液、稀释后精液量等。
12.2 母羊输精配种产羔记录
包括配种母羊号、与配公羊号、输精日期及次数、预产期、实产期、产羔数及同胎羔羊数等。
12.3 档案管理
按照《畜禽标识和养殖档案管理办法》的规定执行。
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